产品货号：
WH0007
中文名称：
血液样本直接PCR试剂盒
英文名称：
Blood direct PCR kit
产品规格：
100次|500次
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒利用基因工程改造的抗抑制性DNA聚合酶，能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。配合精心优化的Buffer体系，具有超强抗PCR抑制物能力，可直接以血液/培养细胞为模板进行PCR扩增，操作简便，无需进行DNA的纯化或样品前处理等繁琐步骤。试剂盒的PCR组分为2×预混Mix，只需加入血液模板和相应检测引物即可进行反应，适于人、小鼠、猪、牛等哺乳动物和禽类等物种的培养细胞，新鲜及4℃储存冷冻全血、抗凝血（EDTA、柠檬盐、肝素)、液化的血凝块及贮存在Whatman903和FTA?Elute商用卡上的干血斑等样本PCR检测。PCR产物3'端为A，可直接用于TA载体克隆。可用于基因组DNA片段的扩增检测、高通量遗传分析和基因分型（如基因缺失）等研究。
产品特点：
·简便快捷：直接以血液为模板进行PCR鉴定，告别样本前处理和DNA提取等繁琐步骤；
·纯度高：不需前处理和DNA提取过程，避免样本交叉污染问题；
·通量高：配合96/384孔PCR板使用，可进行大规模样本的PCR鉴定工作；
·普适性强：有效扩增高GC或具有复杂二级结构的片段，扩增长度可达5kb；
·抗逆性强：适用于多物种、多种不同保存方式的血液样品。
扩增实例：
以人类EDTA抗凝血为模板，用本试剂盒对4个GC含量不同的基因进行扩增，PCR反应体系为20μL，血液加样量为1μL。
1：片段长度1090bp,GC含量68.1%；
2：片段长度1915bp,GC含量70.4%；
3：片段长度448bp,GC含量74.8%；
4：片段长度1527bp,GC含量61.5%；
实验结果：本试剂盒可高效扩增GC含量为61.5～74.8之间的基因片段，具有扩增高GC片段的能力。
长片段扩增：扩增片段长度可达4kb。
以人类EDTA抗凝血为模板，用本试剂盒对ActB，Prp，DN1.0，Hn2.0和Hn4.0等5个长度不同的基因进行扩增，PCR反应体系为20μL,1μL血液为模板。
实验结果：本试剂盒扩增片段长度可达4kb，具有较强的长片段扩增能力。
抗逆性强：血液模板加入范围可达0.1～5μL。
以人类EDTA抗凝血为模板，用本试剂盒进行不同血液加样量的PCR检测，PCR反应体系为20μL，产物长度为750bp。
实验结果：本试剂盒对血液有很强的抗逆性，可覆盖0.1～5μL的血液模板范围。
样品适用广泛：适用于多种保存形式的样本。
以人类、大鼠、鸡等物种不同处理方式的血液样品为模板，用本试剂盒分别对PRNP（人，750bp)，Actin（大鼠，200bp)和β-Actin（鸡，1kb)等基因进行扩增，PCR反应体系为20μL，血液模板样本量为1μL。
实验结果：本试剂盒具有广泛的样品适用性，可以对不同物种的不同处理方式的血液样品进行直接PCR检测。
试剂盒组成：
保存条件：-20℃条件下可保存12个月；从-20℃取出使用时，将冻存的2×BloodDirect PCR MasterMix融解，然后轻轻颠倒混匀，待溶液完全均一后再行使用。如需一段时间内经常取用，可在2～8℃条件下储存3个月，但要避免反复多次冻融。
注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．过多的血液模板会抑制PCR扩增反应，请参考“血液模板的建议用量”来调整模板用量。在20μL反应体系中，最适的模板加入量为1～2μL。初次实验时，建议在1～5μL范围内设置梯度模板加入量，以便找到最适模板用量。
2．若使用其他不同的反应体积请等比例减少或增加模板使用量。
3．扩增产物由于血液模板中血红蛋白的变性而呈现浑浊现象，这不影响后续的电泳检测，但如果后续进行克隆、测序等实验则需对产物进行纯化。
使用方法：
注意：以下举例仅供参考，实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据实际情况，设定最佳反应条件。
1．使用血液直接PCR试剂盒，以人类EDTA抗凝血为模板，扩增1kb的片段。
2．按照下表中各组分的加入量进行反应液的配制。
反应体系：
血液模板用量建议（以20μL反应体系为例）：
3．按照下表设置PCR反应程序。
反应程序：
4．结果检测：反应结束后取10μL反应产物，进行琼脂糖凝胶电泳检测。
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产品特点：
·简便快捷：直接以血液为模板进行PCR鉴定，告别样本前处理和DNA提取等繁琐步骤；
·纯度高：不需前处理和DNA提取过程，避免样本交叉污染问题；
·通量高：配合96/384孔PCR板使用，可进行大规模样本的PCR鉴定工作；
·普适性强：有效扩增高GC或具有复杂二级结构的片段，扩增长度可达5kb；
·抗逆性强：适用于多物种、多种不同保存方式的血液样品。
扩增实例：
以人类EDTA抗凝血为模板，用本试剂盒对4个GC含量不同的基因进行扩增，PCR反应体系为20μL，血液加样量为1μL。
1：片段长度1090bp,GC含量68.1%；
2：片段长度1915bp,GC含量70.4%；
3：片段长度448bp,GC含量74.8%；
4：片段长度1527bp,GC含量61.5%；
实验结果：本试剂盒可高效扩增GC含量为61.5～74.8之间的基因片段，具有扩增高GC片段的能力。
长片段扩增：扩增片段长度可达4kb。
以人类EDTA抗凝血为模板，用本试剂盒对ActB，Prp，DN1.0，Hn2.0和Hn4.0等5个长度不同的基因进行扩增，PCR反应体系为20μL,1μL血液为模板。
实验结果：本试剂盒扩增片段长度可达4kb，具有较强的长片段扩增能力。
抗逆性强：血液模板加入范围可达0.1～5μL。
以人类EDTA抗凝血为模板，用本试剂盒进行不同血液加样量的PCR检测，PCR反应体系为20μL，产物长度为750bp。
实验结果：本试剂盒对血液有很强的抗逆性，可覆盖0.1～5μL的血液模板范围。
样品适用广泛：适用于多种保存形式的样本。
以人类、大鼠、鸡等物种不同处理方式的血液样品为模板，用本试剂盒分别对PRNP（人，750bp)，Actin（大鼠，200bp)和β-Actin（鸡，1kb)等基因进行扩增，PCR反应体系为20μL，血液模板样本量为1μL。
实验结果：本试剂盒具有广泛的样品适用性，可以对不同物种的不同处理方式的血液样品进行直接PCR检测。
试剂盒组成：
| 组分 | 100T | 500T |
| 2×Blood Direct PCR MasterMix | 1mL | 5×1mL |
| RNase-Free ddH2O | 1mL | 5×1mL |
保存条件：-20℃条件下可保存12个月；从-20℃取出使用时，将冻存的2×BloodDirect PCR MasterMix融解，然后轻轻颠倒混匀，待溶液完全均一后再行使用。如需一段时间内经常取用，可在2～8℃条件下储存3个月，但要避免反复多次冻融。
注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．过多的血液模板会抑制PCR扩增反应，请参考“血液模板的建议用量”来调整模板用量。在20μL反应体系中，最适的模板加入量为1～2μL。初次实验时，建议在1～5μL范围内设置梯度模板加入量，以便找到最适模板用量。
2．若使用其他不同的反应体积请等比例减少或增加模板使用量。
3．扩增产物由于血液模板中血红蛋白的变性而呈现浑浊现象，这不影响后续的电泳检测，但如果后续进行克隆、测序等实验则需对产物进行纯化。
使用方法：
注意：以下举例仅供参考，实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据实际情况，设定最佳反应条件。
1．使用血液直接PCR试剂盒，以人类EDTA抗凝血为模板，扩增1kb的片段。
2．按照下表中各组分的加入量进行反应液的配制。
反应体系：
| 组分 | 50μL体系 | 20μL体系 | 终浓度 |
| 血液样品模板 | 2.5μL | 1μL | - |
| 正向引物（10μM） | 1.25μL | 0.5μL | 250 nM |
| 反向引物（10μM） | 1.25μL | 0.5μL | 250 nM |
| 2×Blood Direct PCR MasterMix | 25μL | 10μL | 1× |
| RNase-Free ddH2O | 至50μL | 至20μL | - |
血液模板用量建议（以20μL反应体系为例）：
| 模板种类 | 处理方法 | 用量范围 | 最佳用量 |
| 人类抗凝血 | 无需处理 | 0.1～5μL | 1μL |
| 鼠类抗凝血 | 无需处理 | 0.1～5μL | 1μL |
| 禽类抗凝血 | 无需处理 | 0.1～5μL | 1μL |
| 人类血凝块 | 进行液化处理 （目录号WH9001) | 0.1～5μL | 1μL |
| 干血斑 | 利用打孔器打下干血斑 | 1～2片直径 3mm的干血斑 | 1片直径 3mm的干血斑 |
| 培养细胞 | 离心除去培养基， 用适量TE悬浮细胞， 以细胞悬液为模板 | 1-103个 | 100个 |
3．按照下表设置PCR反应程序。
反应程序：
| 阶段 | 循环数 | 温度 | 时间 | 内容 |
| 预变性 | 1 | 95℃ | 3～5min | 预变性 |
| PCR反应 | 35～40 | 94℃ | 15sec | 变性 |
| 60℃ | 20sec | 退火 | ||
| 72℃ | 1min | 延伸 | ||
| 补充延伸 | 1 | 72℃ | 5min | 补充延伸 |
4．结果检测：反应结束后取10μL反应产物，进行琼脂糖凝胶电泳检测。
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